（考試時間：90分鐘；分值：9 0分
一、選擇題（本題 共45小題，每題 1分，共45分）
1．下列敘述符合基因工程概念的是( )
A．B淋巴細胞與腫瘤細胞融合，雜交瘤細胞中含有B淋巴細胞中的抗體基因
B．將人的干擾素基因重組到質粒后導入大腸桿菌，獲得能產生人干擾素的菌株
C．用紫外線照射青霉菌，使其DNA發生改變，通過篩選獲得青霉素高產菌株
D．自然界中天然存在的噬菌體自行感染細菌后其DNA整合到細菌DNA上
2.下列關于限制酶的說法正確的是( )?
A.限制酶廣泛存在于各種生物中，微生物中很少分布?
B.一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列?
C.不同的限制酶切割DNA后都會形成黏性末端?
D.限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氫鍵?
3．基因工程的操作步驟：①使目的基因與運載體相結合，②將目的基因導入受體細胞，③目的基因的檢測和表達 ④提取目的基因。正確的操作順序是（ ）
A．③②④① B．②④①③ C．④①②③ D．③④①②
4.在基因工程中，把選出的目的基因（共1000個脫氧核苷酸對，其中腺嘌呤脫氧核苷酸是460個）放入DNA擴增儀中擴增4代，那么，在擴增儀中應放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個數是（ �。�
A．540個 B．8100個 C．17280個 D．7560個
5. EcoRⅠ和SmaⅠ限制酶識別的序列均由6個核苷酸組成，但切割后產生的結果不同，
其識別序列和切割位點(圖中箭頭處)如圖所示，據圖分析下列說法正確的是 ( )
EcoRⅠ SmaⅠ
A．所有限制酶的識別序列均由6個核苷酸組成
B．SmaⅠ切割后產生的是黏性末端
C．用DNA連接酶連接平末端和黏性末端的效率一樣
D．細菌細胞內的限制酶可以切割外源DNA，防止外源DNA入侵 [來源:學+科+網Z+X+X+K]
6．基因工程的核心是( )。
A．目的基因的獲取 B．基因表達載體的構建
C．將目的基因導入受體細胞 D．目的基因的檢測與鑒定
7．右圖為表達載體的模式圖，若結構X是表達載體所必需的，則X最可能是( )
A．氨芐青霉素抗性基因
B．啟動子
C．限制酶
D．DNA連接酶
8．基因治療是指( )
A．把健康的外源基因導入有基因缺陷的細胞中，達到治療疾病的目的
B．對有缺陷的細胞進行修復，從而使其恢復正常，達到治療疾病的目的
C．運用人工誘變的方法，使有基因缺陷的細胞產生基因突變恢復正常
D．運用基因工程技術，把有缺陷的基因切除，達到治療疾病的目的
9．科學家用納米技術制造出一種“生物導彈”，可以攜帶DNA分子。把它注射入組織中，可以通過細胞的內吞作用的方式進入細胞內，DNA被釋放出來，進入到細胞核內，最終整合到細胞染色體中，成為細胞基因組的一部分，DNA整合到細胞染色體中的過程，屬于( )
A．基因突變 B．基因重組 C．基因互換 D．染色體變異
10．下面甲、乙兩圖表示從細菌細胞中獲取目的基因的兩種方法，下列說法中，錯誤的是（ ）
A．甲方法可建立該 細菌的基因組文庫 B．乙方法可建立該細菌的cDNA文庫
C．甲方法要以脫氧核苷酸為原料 D．乙方法需要逆轉錄酶參與
11.限制酶是一種核酸切割酶,可辨識并切割DNA分子上特定的核苷酸堿基序列。下圖為四種限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ以及BglⅡ的辨識序列。箭頭表示每一種限制酶的特定切割部位,其中哪兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端可以互補黏合?其正確的末端互補序列是什么?( )[來源:學§科§網]
A.BamHⅠ和EcoRⅠ;末端互補序列為—AATT—
B.BamHⅠ和HindⅢ;末端互補序 列為—GATC—
C.EcoRⅠ和HindⅢ;末端互補序列為—AATT—
D.BamHⅠ和BglⅡ;末端互補序列為—GATC—
12．基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質粒，便于重組和篩選。已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是—↓GATC—。根據下圖示判斷下列操作正確的是（ ）
A．目的基因和質粒均用限制酶Ⅱ切割
B．目的基因和質粒均用限制酶Ⅰ切割
C．質粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割
D．質粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
13.下圖為DNA分子的某一片段，其中①②③分別表示某種酶的作用部位，相應的酶依次是（ ）
A．DNA連接酶、限制酶、解旋酶 B．限制酶、解旋酶、DNA連接酶
C．解旋酶、限制酶、DNA連接酶 D．限制酶、DNA連接酶、解旋酶
14．如圖為基因工程的部分操作過程示意圖，甲～ 丁代表各不同階段參與作用的成分。根據圖示資料，下列敘述正確的是( )
A．細菌中的質粒都可以作為甲 B．丙是生物體內的RNA分子
C．乙和丁所用的酶相同 D．圖中各個過程都可在試管內完成
15. 關于現代生物技術應用的敘述，錯誤的是( )
A．蛋白質工程可合成自然界中不存在的蛋白質
B．體細胞雜交技術可用于克隆動物和制備單克隆抗體
C．植物組織培養技術可用于植物莖尖脫毒
D．動物細胞培養技術可用于轉基因動物的培育
16．下列不屬于動物細胞工程應用的是 ( )
A．大規模生產干擾素．用于抵抗病毒引起的感染
B．為大面積燒傷的病人提供移植的皮膚細胞
C．大規模生產食品添加劑、殺蟲劑等
D．利用胚胎移植技術，加快優良種畜的繁殖
17．下圖為植物組織培養的基本過程，則制作人工種子，及生產治療燙傷、割傷的藥物紫草素，應分別選用編號是的（ ）
A．④② B．③② C．③④ D．④③
18．下列關于細胞工程的有關敘述，不正確的是 （ ）
A．利用花藥離體培養得到單倍體植株，從紫草的愈傷組織中提取紫草素，利用細胞工程培育“番茄-馬鈴薯”雜種植株，都利用了植物組織培養技術，而利用秋水仙素處理萌發的種子或幼苗得到多倍體植株沒有采用植物組織培養技術
B．在進行組織培養時，由根尖細胞形成愈傷組織的過程中，可能會發生細胞脫分化，染色體變異或基因突變，而不可能發生細胞分化和基因重組
C．動物細胞融合與植物體細胞雜交相比，誘導融合的方法，所用的技術手段，所依據的原理均相同，都能形成雜種細胞和雜種個體
D．“試管嬰兒”實質上就是“體外受精”和“胚胎移植”的“產物”，不能使不能產生精子或卵細胞的夫婦能得到自己的孩子；單克隆抗體的制備采用了動物細胞融合技術和動物細胞培養技術
19.運用動物細胞工程技術制備單克隆抗體的正確操作步驟是( )
①篩選雜交瘤細胞�、谥苽涮禺愋钥乖、勖庖邉游铩、苤苽涿庖叩募毎凸撬枇黾毎、菽墚a生特定抗體的雜交瘤細胞�、薮罅颗囵B雜交瘤細胞�、哒T導細胞融合
⑧單克隆抗體的大量制備
A．②④③⑦⑤①⑥⑧ B．②③④⑦①⑤⑥⑧
C．④③⑦②⑤①⑧⑥ D．③④⑦①⑤⑧⑥②
20. 植物體細胞雜交與動物細胞工程中所用技術或方法與原理不相符的是( )
A．植物組織培養和單克隆抗體——細胞的全能性
B．纖維素酶．果膠酶處理植物細胞壁——酶的專一性
C．原生質體融合和動物細胞融合——細胞膜的流動性
D．紫草細胞培養和雜交瘤細胞的培養——細胞增殖
21．單克隆抗體是指（�。�
A．單個骨髓瘤細胞增殖產生的抗體
B．單個B淋巴細胞增殖產生的抗體
C．單個雜交瘤細胞增殖產生的高度純一的抗體
D．單個抗體通過克隆化，產生大量抗體
22．下列關于利用細胞工程技術制備單克隆抗體的敘述，不正確的是( )。
A．給小鼠注射抗原，是為了獲得能產生相應抗體的B細胞
B．B細胞與骨髓瘤細胞混合培養，是為了獲得融合細胞
C．雜交瘤細胞進行體外培養，是為了獲得單克隆抗體
D．雜交瘤細胞進行體內培養，是為了獲得能產生單克隆抗體的胚胎
23. 對于下面制備單克隆抗體過程示意圖，不正確的敘述是( )[來源:學_科_網]
A．①表示B淋巴細胞和骨髓瘤細胞均是從小鼠的脾臟中提取的
B．④中的篩選是通過抗原、抗體反應進行的
C．②促進細胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介導
D．⑤可以無限增殖
24 ．利用細胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關敘述正確的是
A．用純化的核衣殼蛋白反復注射到小鼠體內，產生的血清抗體為單克隆抗體
B．體外培養單個效應B細胞可以獲得大量針對SARS病毒的單克隆抗體
C．將等量效應B細胞和骨髓瘤細胞混合，經PEG誘導融合后的細胞均為雜交瘤細胞
D．利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結合的方法可診斷出病毒感染者
25.美國得克薩斯州科學家在2002年2月14 日宣布，他們已經培育出世界上第一只克隆貓，這只名為CC的小貓貓色花白，看上去完全不像生養它的花斑貓媽媽，也不完全像為它提供細胞核的基因貓媽媽�？赡苷_的解釋是( )
A．發生了基因重組所造成的結果 B.周圍環境作用的結果
C．提供卵細胞的細胞質基因調控的結果 D.生養它的花斑貓媽媽基因調控的結果
26.“生物導彈”是免疫導向藥物的形象稱呼，它由單克隆抗體與藥物、酶或放射性同位素配合而成，因帶有單克隆抗體而能自動導向，在生物體內與特定目標細胞或組織結合，并由其攜帶的藥物產生治療作用。下列有關單克隆抗體和“生物導彈”的敘述，錯誤的是（ ）
A. 單克隆抗體是僅由一種類型的細胞制造出來的抗體
B. 單克隆抗體不能與靶細胞內的抗原發生特異性結合
C. 用以治療癌癥的“生物導彈”就是以單克隆抗體作抗癌藥物定向殺死癌細胞
D. “生物導彈”具有高度選擇性，對異常細胞具有命中率高、殺傷力強的優點
27.下列生物技術與相應的實驗 目的，配對不正確的是（ ）
A．胚胎分割移植——獲得遺傳特性相同的后代
B．植物組織培養——獲得克隆植物
C．培養莖尖分生組織——獲得抗病毒的植物苗
D．用適宜濃度的生長素浸泡插條基部——提高扦插枝條的成活率
28.下列關于細胞工程的敘述，錯誤的是 （ ）
A.電刺激可誘導 植物原生質體融合或動物細胞融合
B.去除植物細胞的細胞壁和將動物組織分散成單個細胞均需酶處理
C.小鼠骨髓瘤細胞和經抗原免疫小鼠的B淋巴細胞融合可制備單克隆抗體
D.某種植物甲乙兩品種的體細胞雜種與甲乙兩品種雜交后代的染色體數目相同
29．有關全能性的敘述，不正確的是( ) A．受精卵在自然條件下能使后代細胞形成完整個體，因此全能性最高
B．生物體內細胞由于分化，全能性不能表達
C．卵細胞與受精卵一樣，細胞未分化，全能性很高
D．植物細胞離體培養在一定條件下能表現出全能性
30．人工種子是人們模仿天然種子結構制造出來的生命有機體，它能像天然種子一樣萌發生長。人工種子的核心部分胚狀體可以由懸浮培養的芽尖細胞得到，也可以通過試管培養的花粉或胚囊獲得，由此人們把胚狀體分為“體細胞胚”和“花粉胚”。請據此判斷下列說法中不正確的是 ( )
A．人工種子可以解決有些作物品種繁殖能力差、結籽困難、發芽率低等問題
B．培育胚狀體利用了植物組織培養技術
C．同一種植物“體細胞胚”和“花粉胚”的染色體組的數目比為1∶1
D．該項技術的成功應用反映了細胞的全能性
31.下列四個選項中,沒有采用植物組織培養技術的一項是( )。
A.花藥的離體培養得到單倍體植株
B.秋水仙素處理萌發的種子或幼苗獲得多倍體植株
C.基因工程培育的抗棉鈴蟲的棉花植株
D.細胞工程培育“番茄—馬鈴薯”雜種植株
32.從某海洋動物中獲得一基因，其表達產物為一種抗菌性和溶血性均較強的多肽P1。目前在P1的基礎上研發抗菌性強但溶血性弱的多肽藥物，首先要做的是( )
A．合成編碼目的肽的DNA片段
B．構建含目的肽DNA 片段的表達載體
C．依據P1氨基酸序列設計多條模擬肽
D．篩選出具有優良活性的模擬肽作為目的肽
33．下列關于動物細胞工程的敘述，正確的是 ( )
A．PEG誘導動物細胞融合形成的雜種細胞，經動物細胞培養能得到優良動物個體
B．使用冷凍保存的正常細胞通常為10代以內，以保持細胞正常的二倍體核型
C．在高倍顯微鏡下觀察發生基因突變的細胞比例可推知某化學藥品的毒性
D．用胰蛋白酶處 理動物組織后，可用無菌水稀釋制成細胞懸浮液
34.科學家培育“熒光豬”的技術流程如圖所示。字母表示有關技術或原理，正確的是（ ）
A.a農桿菌轉化法 B.b體外受精
C.c有絲分裂與減數分裂 D.d胚胎移植
35.下列屬于精子、卵子發生上的區別的是( )
A．細胞的分裂方式 B．卵子在卵巢內的儲備
C．成熟細胞的染色體數量 D．細胞遺傳物質的變化
36．受精過程的順序為( )
①第一次卵裂開始 ②釋放第二極體 ③頂體反應 ④穿越透明帶
⑤雌、雄原核的形成 ⑥核膜消失，雌、雄原核融合
A．①②③④⑤⑥ B．③②④⑤⑥①
C．④⑤②①③⑥ D．③④②⑤⑥①
37．下列關于生物工程技術的有關敘述，不正確的是( )
A．哺乳動物體細胞核移植的成功率小于胚胎細胞核移植
B．為了提高胚胎移植的成功率，需要利用激素對受體進行超數排卵處理
C．胚胎干細胞是一類未分化細胞，可從胎兒的生殖腺細胞中分離獲取
D．“試管嬰兒”是“體外受精”、“胚胎移植”的“產物”，不能使不能產生精子或卵細胞的夫婦得到自己的孩子
38.供、受體母牛選擇好后，要用激素進行同期發情處理的原因是（ ）
A、防止受體牛不愿意接受胚胎
B、只有受體與供體的生理狀態相同，被移植的胚胎才能繼續正常發育
C、只要發情排卵后，各階段時間內的變化，供、受體生理狀態完全相同
D、同期發情處理后，卵細胞和精子受精結合能力強
39．下列有關哺乳動物胚胎發育和胚胎工程的敘述，正確的是( )
A．沖卵指的是從輸卵管中沖出胚胎，而非沖出卵子
B．滋養層細胞發育成胎膜和胎盤是在囊胚期
C．所有動物胚胎移植的最佳時期都相同
D．胚胎移植實際上是生產胚胎的供體和孕育胚胎的受體共同繁殖后代的過程
40.下列有關說法錯誤的是（ ）
A．排卵是指卵子從卵泡中排出
B．胚胎移植中沖卵是指用特制裝置把母畜子宮內的卵子沖洗出來
C．從卵巢采集的卵母細胞必須經培養后才能與精子體外受精
D．精子必須經過獲能后才能與卵母細胞體內受精或體外受精
41.關于ES細胞的應用敘述錯誤的是（ ）
A．可以用于治療由于細胞壞死，退化或功能異常引起的疾病
B．在體外誘導分化可培育出人造組織器官
C．是研究體外細胞分化的理想材料
D．不能用于治療糖尿病、肝衰竭等疾病
4 2．胚胎移植成功率的高低取決于( ) A．供、受體生理環境的一致性 B．早期胚胎是否處于游離狀態
C．胚胎移植是否存在免疫問題 D．胚胎和受體是否有聯系
43．我國引進良種肉牛后，理論上使其快速繁殖的方法有( )
①組織培養 ②克隆�、垠w外受精和胚胎移植�、芑蚬こ獭、菖咛シ指睢�
⑥體細胞雜交
A．①②⑥ B．②④⑥ C．②③⑤ D．①②⑤
44．下列有關生殖細胞的發生和受精過程的敘述錯誤的是( )
A．雄原核形成的同時，卵子完成減數第二次分裂
B．透明帶反應是防止多精入卵的第一道屏障
C．精子與卵細胞膜相互融合，精子入卵
D．卵子是從動物的初情期開始，經過MⅠ和MⅡ兩次連續分裂形成的
45.下列細胞中,哪一個代表已經完成受精的卵子?( )
二、非選擇題(共55分)
1．以下是科學家采用不同方法培育良種牛的過程，a～h為操作過程，據圖回答（12分）
（1）“試管牛”技術的操作流程是 （填字母）。
（2）圖中數字標號代表的結構名稱是：① ， ② 。
（3）圖中用到的激素是 ，過程h常用的方法是 。
（4）完成a過程之前，要對精子進行 處理， 處理后的精子與卵子相遇時，首先發生 反應，受精時，防止多精子入卵的兩道屏障是 和 。
（5）自然情況下，牛完成體內受精的場所是 ，胚胎分割時，一般選擇
時期的胚胎，分割時要注意 。
2.下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。（20分）
(1)________技術是單克隆抗體技術的基礎。
(2)在圖中HAT培養基屬于 培養基，只有融合的雜種細胞才能生長。動物細胞融合除了采用植物細胞原生質體融合常用的誘導劑外，還可以采用________。
(3)單克隆抗體與常規的血清抗體相比，最主要的優點是________________。
(4)選出的雜交瘤細胞既具備骨髓瘤細胞的迅速________特點，又具備淋巴細胞的________特點，經過選擇性培養的雜交瘤細胞，還需進行__________和________，經多次篩選，就可獲得足夠數量的能分泌所需抗體的細胞。
(5)淋巴細胞是由動物體骨髓中的________細 胞分化、發育而來的。
(6)單克隆抗體能定向攻擊癌細胞，主要是利用其________性。
3.科學家培育熒光鼠的設計思路可用下面的圖解表示。據圖回答下列問題(10分)
(1)科學家在過程A中對天然質粒做的修飾改造是________。B過程用到的工具酶有______________ 。
(2)E過程為體外受精，卵子的狀態應達到________期才能與獲能后的精子完成受精。G過程應用的技術稱為________，此時的胚胎應發育到 時期。
(3)檢測熒光小鼠細胞內是否含有基因X，常用的技術手段是______________________；判斷轉基因熒光鼠熒光基因的表達是否成功，在個體水平上應檢測__________________________________。
(4)如果想一次繁殖多只轉基因鼠，則需要在過程G中實施____________，胚胎移植時應選擇 的 的受體。
4.請回答有關下圖的問題（13分）
(1)圖甲中①～⑤所示的生物工程為________________。該工程通過對__________的修飾或合成，對現有的________進行改造，或制造出一種新的蛋白質，以滿足人類生產生活的需求。
(2)圖甲中序號④所示過程叫做________________，需要用到的酶是 。
(3)如圖乙，一個基因表達載體的組成，除了目的基因外，在基因尾端還必須有[2]________；圖中[3]________的作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。
(4)若預期蛋白質欲通過乳腺生物反應器生產，則構建基因表達載體時，圖乙中序號[1]代表的是________；且在圖甲中⑨過程之前，要對精子進行篩選，保留含性染色體________的精子。
(5)為獲得較多的受精卵進行研究，圖甲中⑥過程一般用 激素對供體做________處理；為提高培育成功率，進行⑩過程之前，要對________動物做________處理，以使其達到相同的生理狀態。
參考答案
一、選擇題（45分，每題1分）
1----10 BBCBD BBABC
11—20 DDCDB CBCBA
21—30 CDADC CCDCC
31—40 BCBDB ABBDB
41—45 DACDC
二、非選擇題
（3）促性腺激素 顯微注射法
（4）獲能 頂體 透明帶反應 卵細胞膜反應
（5）輸卵管 桑椹胚或囊胚 將內細胞團均等分割
2(20分，每空2分)答案：(1)動物細胞培養 (2)選擇 滅活的病毒 (3)特異性強，靈敏度高，并可大量制備(4)在體外大量增殖 分泌專一抗體 克隆化培養 抗體檢測 (5) 造血干 (6)特異性
3（10分，每空1分）(1)添加終止子 限制性核酸內切酶、DNA連接酶 (2)減數第二次分裂中(MⅡ) 胚胎移植 桑椹胚或囊胚 (3)DNA分子雜交技術 小鼠身體是否有熒光 (4)胚胎分割 同種 生理狀態相同
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