一、選擇題(每小題5分，共65分)
1．(2010•蘇州模擬)下圖為DNA分子在不同酶的作用下所發生的變化，圖中依次表示限制
性核酸內切酶、DNA聚合酶、DNA連接酶、解旋酶作用的正確順序是( )
A．①②③④B．①②④③
C．①④②③D．①④③②
解析：①是將一個DNA切成互補的兩個黏性末端，由限制性核酸內切酶發揮作用；DNA
聚合酶是在DNA復制時發揮作用的(④是DNA復制)；DNA連接酶是將兩個DNA片段
連接在一起(②)；解旋酶是將DNA分子雙鏈解成兩條互補的單鏈(③)。
答案：C
2．(2010•蘇北四市三模)可以用于重組DNA技術的酶是(多選)( )
A．DNA聚合酶B．限制性核酸內切酶
C．DNA連接酶D．反轉錄酶
解析：DNA重組技術會用DNA聚合酶(實現目的基因的擴增，如PCR)、限制性核酸內
切酶(目的基因的切割和運載體的切割)、DNA連接酶(目的基因與運載體的連接)、反轉
錄酶(目的基因的獲取)。
答案：ABCD
3．(2010•蘇、錫、常、鎮學情調查二)下列DNA片段能夠用DNA連接酶連接起來的是( )
…GC…CG ① G…TGCAC…② GT……GC�、邸�…CTGCA…G ④ GC…CG… ⑤ …G …CTTAA⑥
A．①和⑤B．①和⑤、②和④
C．①和③D．①和③、④和⑥
解析：黏性末端如果堿基數目相同且能夠互補配對即可用DNA連接酶相連；平末端則
堿基相同且兩條鏈序列相反即可用DNA連接酶連接，具備這個特點的只有①和⑤。
答案：A
4．(2010•南通一模)下列有關限制性內切酶識別的敘述，不正確的是( )
A．從反應類型來看，限制性內切酶催化的是一種水解反應
B．限制性內切酶的活性受溫度、pH的影響
C．一種限制性內切酶只能識別雙鏈DNA中某種特定的脫氧核苷酸序列
D．限制性內切酶識別序列越短，則該序列在DNA中出現的幾率就越小
解析：限制性內切酶識別序列越短，則該序列在DNA中出現的幾率就越大。
答案：D
5．(2010•南京三模)下列關于染色體和質粒的敘述，正確的是( )
A．染色體和質粒的化學本質都是DNA
B．染色體和質粒都只存在于原核細胞中
C．染色體和質粒都與生物的遺傳有關
D．染色體和質粒都可作為基因工程的常用載體
解析：染色體由DNA和蛋白質構成；原核生物沒有染色體；質�？梢宰鰹榛蚬こ痰�
載體，而染色體不行。
答案：C
6．(2010•杭州質檢一)下圖表示一項重要的生物技術，對圖中物質a、b、c、d的描述，正確
的是( )
A．a的基本骨架是磷酸和核糖交替連接而成的結構
B．要獲得相同的黏性末端，可以用不同種b切割a和d
C．c連接雙鏈間的A和T，使黏性末端處堿基互補配對
D．若要獲得未知序列d，可到基因文庫中尋找
解析：從圖示看，a中含有胸腺嘧啶，故其基本骨架是磷酸和脫氧核糖交替連接而成；
DNA連接酶縫合目的基因和載體質粒之間的縫隙，使兩者之間形成磷酸二酯鍵；若要
獲得未知序列的目的基因，可從基因文庫中尋找；若要獲得相同的黏性末端，可以用不
同種的限制性核酸內切酶處理，如識別↓GATC的限制性核酸內切酶和識別G↓GATCC的
限制性核酸內切酶處理目的基因和載體質粒就可以形成相同的黏性末端。
答案：B
7．(2010•諸暨模擬)采用基因工程技術將人凝血因子基因導入山羊受精卵，培育出了轉基因
羊。但是人凝血因子只存在于該轉基因羊的乳汁中。下列有關敘述，正確的是( )
A．人體細胞中凝血因子基因的堿基對數目，小于凝血因子氨基酸數目的3倍
B．可用顯微注射技術將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導入羊的受精卵
C．在該轉基因羊中，人凝血因子基因只存在于乳腺細胞，而不存在于其他體細胞中
D．人凝血因子基因開始轉錄后，DNA連接酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNA
解析：人體細胞內遺傳信息的表達過程中存在終止密碼子等不編碼氨基酸的情況，因
此，細胞中凝血因子基因的堿基對數目應大于凝血因子氨基酸數目的3倍；在該轉基因
羊中，人凝血因子基因存在于所有的體細胞中；催化mRNA合成的酶是RNA聚合酶。
答案：B
8．(2010•南京市第一次調研)科學家在某種植物中找到了抗枯萎的基因，并以質粒為載體，
采用轉基因方法培育出了抗枯萎病的金茶花新品種，下列有關說法正確的是( )
A．質粒是最常用的載體之一，它僅存在于原核細胞中
B．將抗枯萎基因連接到質粒上，用到的工具酶僅是DNA連接酶
C．用葉肉細胞作為受體細胞培育出的植株不能表現出抗枯萎性狀
D．通過該方法獲得的抗枯萎病金茶花，產生的配子不一定含抗枯萎病基因
解析：質粒在某些真核細胞中也有，如酵母菌；將目的基因連接到質粒上，不但要用到
DNA連接酶，在連接之前要用同一種限制酶處理以得到相同的黏性末端；植物的體細
胞都具有全能性，因此都可以作為受體細胞；由于重組質粒只結合在某條染色體上，因
此有的配子就沒有目的基因。
答案：D
9．(2010•福州模擬)下圖是獲得抗蟲棉的技術流程示意圖�？敲顾乜剐曰�(kanr)常作為
標記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養基上生長。下列敘述正
確的是( )
A．構建重組質粒過程中需要限制性核酸內切酶和DNA連接酶
B．愈傷組織的分化產生了不同基因型的植株
C．卡那霉素抗性基因(kanr)中有該過程所利用的限制性核酸內切酶的識別位點
D．抗蟲棉有性生殖后代能保持抗蟲性狀的穩定遺傳
解析：質粒與目的基因結合時需要用同一種限制性核酸內切酶切割，用DNA連接酶連
接；愈傷組織由相同細胞分裂形成，分化后產生相同基因型的植株；卡那霉素抗性基因
作為標記基因不能有限制性核酸內切酶的切割位點；抗蟲棉有性生殖后代可能會發生性
狀分離，抗蟲性狀不一定能穩定遺傳。
答案：A
10．(2010•汕頭模擬)蛋白質工程與基因工程相比，其突出特點是( )
A．基因工程原則上能生產任何蛋白質
B．蛋白質工程能對現有的蛋白質進行改造，或制造一種新的蛋白質
C．蛋白質工程可以不通過轉錄和翻譯來實現
D．蛋白質工程是在基因工程的基礎上，延伸出來的第三代基因工程
解析：蛋白質工程通過基因修飾或基因合成，對現有蛋白質進行改造，或制造一種新的
蛋白質，以滿足人類生產和生活的需求，是延伸出來的第二代基因工程。
答案：B
11．基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質粒，便于重組和篩選。已知限制
酶Ⅰ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是—↓GATC—。
根據圖示判斷下列操作正確的是( )
A．目的基因和質粒均用限制酶Ⅱ切割
B．目的基因和質粒均用限制酶Ⅰ切割
C．質粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割
D．質粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
解析：本題中要遵循一個原則：不能同時將兩個標記基因切開，至少保留一個，所以只
能用酶Ⅰ切割質粒；而從目的基因右側堿基序列可知只能用酶Ⅱ，切割目的基因才能得
到含目的基因的DNA片段。
答案：D
12．(2010•鹽城二模)細胞通過DNA損傷修復可使DNA在復制過程中受到損傷的結構大部
分得以恢復。下圖為其中的一種方式——切除修復過程示意圖。下列有關敘述不正確的
是( )
A．圖示過程的完成需要限制酶、解旋酶、DNA聚合酶、DNA連接酶等的共同作用
B．圖中二聚體的形成可能受物理、化學等因素的作用所致
C．圖示過程涉及到堿基互補配對原則
D．DNA損傷修復降低了突變率，保持了DNA分子的相對穩定性
解析：圖示過程不需要解旋酶的作用。
答案：A
13.
(2010•南京三模)已知正常的β珠蛋白基因(以βA表示)經MstⅡ限制酶切割后可得到長度
為1.15kb和0.2kb的兩個片段(其中0.2kb的片段通常無法檢測到)，異常的β珠蛋白基
因(以βS表示)由于突變恰好在MstⅡ限制酶切割點上，因而失去了該酶切位點，經MstⅡ
限制酶處理后只能形成一個1.35kb的DNA片段，如圖1；現用MstⅡ限制酶對編號為1、
2、3的三份樣品進行處理，并進行DNA電泳，結果如圖2，則1、2、3號樣品的基因
型分別是(以βA、βS表示相關的基因)( )
A．βSβS、βAβS、βAβAB．βAβA、βAβS、βSβS
C．βAβS、βSβS、βAβAD．βAβS、βAβA、βSβS
解析：由題圖2可知有4個DNA片段，由于βS較βA長，在電泳過程中，遷移速率較慢，
由此可得1號的是由兩段1.35kb的DNA片段組成，其基因型為βSβS,2號是由一段1.35
kb的DNA片段和1.15kb的DNA片段，其基因型為βAβS，3號兩段1.15kb的DNA片
段組成，其基因型為βAβA。
答案：A
二、非選擇題(共35分)
14．(15分)干擾素是動物體內合成的一種蛋白質，可以用于治療病毒感染和癌癥，但體外
保存相當困難，如果將其分子上的一個半胱氨酸變成絲氨酸，就可在－70℃條件下保存
半年，給廣大患者帶來福音。
(1)蛋白質的合成是受基因控制的，因此獲得能夠控制合成“可以保存的干擾素”的基
因是生產的關鍵，依據蛋白質工程原理，設計實驗流程，讓動物生產“可以保存的干擾
素”：
??→設計 ??→推測 ??→合成
(2)基因工程和蛋白質工程相比較，基因工程在原則上只能生產_______的蛋白質，不一
定符合________需要。而蛋白質工程是以蛋白質分子的結構規律及其與生物功能的關系
作為基礎，通過________或________，對現有蛋白質進行________，或制造一種新的蛋
白質，以滿足人類的生產和生活需要。
(3)蛋白質工程實施的難度很大，原因是蛋白質具有十分復雜的________結構。
(4)對天然蛋白質進行改造，應該直接對蛋白質分子進行操作，還是通過對基因的操作
來實現？___________________________________________________________________
__________________________________________________________________________。
原因是：__________________________________________________________________
__________________________________________________________________________。
解析：本題綜合了蛋白質工程與基因工程的異同，并考查了蛋白質工程的原理及在生產
實踐中的應用。蛋白質工程是研究多種蛋白質的結構和功能、蛋白質折疊、蛋白質分子
設計等一系列分子生物學基本問題的一種新型的、強有力的手段。通過對蛋白質工程的
研究，可以深入地揭示生命現象的本質和生命活動的規律�；蚬こ套裱行姆▌t，從
DNA→mRNA→蛋白質折疊產生功能，基本上是生產出自然界已有的蛋白質。蛋白質
工程是按照以下思路進行的：確定蛋白質的功能→蛋白質應有的高級結構→蛋白質應具
備的折疊狀態→應有的氨基酸序列→應有的堿基排列→創造出自然界不存在的蛋白質。
答案：(1)預期蛋白質的功能 蛋白質三維結構 應有的氨基酸序列 相應的脫氧核苷
酸序列(基因) (2)自然界已存在 人類生產和生活 基因修飾 基因合成 改造
(3)空間(或高級) (4)應該從對基因的操作來實現對天然蛋白質的改造 第一，任何一種
天然蛋白質都是由基因編碼的，改造了基因也就是對蛋白質進行了改造，而且改造過的
蛋白質可以通過改造過的基因遺傳下去。如果對蛋白質直接改造，即使改造成功，被改
造過的蛋白質分子也無法遺傳；其次，對基因進行改造比對蛋白質直接進行改造要容易
操作，難度要小得多
15．(20分)蘇云金桿菌(Bt)能產生具有殺蟲能力的毒素蛋白。下圖是轉Bt毒素蛋白基因植物
的培育過程示意圖(ampr為抗氨芐青霉素基因)，據圖回答下列問題。
(1)將圖中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反應管中有_______種DNA片段。
(2)圖中②表示HindⅢ與BamHⅠ酶切、DNA連接酶連接的過程，此過程可獲得________
種重組質粒；如果換用BstⅠ與BamHⅠ酶切，目的基因與質粒連接后可獲得________
種重組質粒。
(3)目的基因插入質粒后，不能影響質粒的________。
(4)圖中③的Ti質粒調控合成的vir蛋白，可以協助帶有目的基因的T?DNA導入植物細
胞，并防止植物細胞中________對T?DNA的降解。
(5)已知轉基因植物中毒素蛋白只結合某些昆蟲腸上皮細胞表面的特異受體，使細胞膜
穿孔，腸細胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風險相對較小，原因是人類腸上
皮細胞________。
(6)生產上常將上述轉基因作物與非轉基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中的
________基因頻率的增長速率。
解析：(1)BamHⅠ在①中有2個切點，HindⅢ在①中有1個切點，故可切出4種DNA片
段。(2)據題圖HindⅢ、BamHⅠ酶切后得到兩種外源DNA片段，則用DNA連接酶連接
后可獲得2種重組質粒。同理，用BstⅠ與BamHⅠ酶切后，得到一種外源DNA片段，
則用DNA連接酶連接后，可獲得1種重組質粒。(3)質粒進入宿主細胞必須能正常復制
才能為目的基因的擴增提供必要的條件。(4)因為植物細胞中有能降解TDNA的酶(DNA
水解酶)。(5)不同生物的基因不同，表達產物的蛋白質也不同。從而造成人類腸上皮細
胞表面無相應毒素蛋白的受體。(6)轉基因與非轉基因作物混種，可降低抗性作物對害
蟲的選擇性，使害蟲種群中的抗性基因頻率增長速率減慢。
答案：(1)4 (2)2 1 (3)復制 (4)DNA水解酶
(5)表面無相應的特異性受體 (6)抗性
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