1.概念理解
基因工程的別名 | 基因拼接技術或DNA重組技術 |
操作環境 | 生物體外 |
操作對象 | 基因 |
操作水平 | DNA分子水平 |
基本過程 | 剪切→拼接→導入→表達 |
結果 | 獲得人類需要的基因產物或定向改造生物性狀 |
原理 | 基因重組 |
(1)基因的“剪刀”——限制性核酸內切酶(簡稱限制酶)
①分布:主要存在于原核生物中。
②特性:一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列,并在特定的切點上切割DNA分子。
③切割結果:產生兩個帶有黏牲末端或平末端的 DNA片段。
④作用:基因工程中重要的切割工具,通常能將外來的DNA切斷,對自己的DNA無損害。
⑤實例:EcoRl限制酶能專一識別CAATTC序列,并在G和A之間將這段序列切開。

(2)基因的“針線”——DNA連接酶
①催化對象:兩個具有相同末端的DNA片段。
②催化位置:脫氧核糖與磷酸之間的切口。
③催化結果:形成重組DNA。
(3)常用的載體——質粒
①本質:小型環狀DNA分子。


3.基因工程操作的基本步驟

育種方法的選擇:
在具體育種工作中,應針對不同的育種目標采取不同的育種方案。
育種目標 | 育種方案 |
集中雙親優良性狀 | 雜交育種(耗時較長,但簡便易行) |
對原品系實施“定向”改造 | 基因工程及細胞工程(植物體細胞雜交) |
讓原品系產生新性狀(無中生有) | 誘變育種(可提高突變頻率,期望獲得理想性狀) |
對原品性狀進行“增大”或“加強” | 多倍體育種 |
保持原品種的“優良”特性,且快速繁殖 | 植物組織培養、動物體細胞克。ɑ蚺咛ヒ浦玻 |
表解幾種育種方式的不同:
名稱 | 原理 | 方法 | 優點 | 缺點 | 應用 |
雜交育種 | 基因重組 | 培育純合子品種:雜交→自交→篩選出符合要求的表現型,自交到不發生性狀分離為止(純合化) | 使分散在同一物種不同品種中的多個優良性狀集中于同一個體上,即“集優” | (l)育種時間長 (2)局限于同一種或親緣關系較近的個體 | 用純種高干抗病小麥與矮桿不抗病小麥培育矮桿抗病小麥 |
培育雜種優勢品種:一般是選取純合雙親雜交 | 年年制種 | 雜交水稻、玉米 | |||
誘變育種 | 基因突變 | ①物理:紫外線、X射線,微重力、激光等處理,再篩選;②化學:亞硝酸、硫酸二乙酯處理,再選擇 | 提高變異頻率,加快育種進程,大幅度改良某些性狀 | 有利變異少,需大量處理實驗材料(有很大盲目性) | 高產青霉菌,“黑農五號”大豆品種等的培育和高產雄性家蠶的培育 |
單倍體育種 | 染色體數目變異 | ①先進行花藥離體培養出單倍體植株;②將單倍體幼苗經一定濃度的秋水仙素處理獲得純合子;③從中選擇優良植株 | 明顯縮短育種年限,子代均為純合子,加速育種進程 | 技術復雜且需與雜交育種配合 | 用純種高桿抗病小麥與矮桿不抗病小麥快速培育矮桿抗病小麥 |
多倍體育種 | 染色體數目變異 | 用一定濃度的秋水仙素處理萌發的種子或幼苗 | 操作簡單,能較快獲得所需品種 | 所獲品種發育延遲,結實率低,一般只適用于植物 | 三倍體無籽西瓜、八倍體小黑麥 |
轉基因育種 | 基因重組 | 提取目的基因→裝入運載體→導入受體細胞→目的基因的表達與檢測→篩選出符合要求的新品種 | 目的性強;育種周期短;克服了遠緣雜交不親和的障礙 | 技術復雜,安全性問題多 | 轉基因“向日葵豆”、轉基因抗蟲棉 |
易錯點撥:
1、限制酶切割DNA分子斷裂的化學鍵是磷酸二酯鍵,DNA連接酶所修復的也是磷酸二酯鍵。
2、基因工程中常用的受體細胞有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農桿菌、酵母菌和動植物細胞。
3、用同一種限制酶切割目的基因和運載體,才能產生相同的黏性末端,使得DNA分子的堿基重新實現互補配對。
知識拓展:
基因工程的應用
(1)作物育種:利用基因工程的方洼,獲得高產、穩產和具有優良品質的農作物,培育出具有各種抗知識拓展逆性的作物新品種,如抗蟲棉、耐貯存的番茄等。
(2)藥物研制:培育轉基因生物,利用轉基因生物生產出各種高質量、低成本的藥品,如胰島素、干擾素、乙肝疫苗等。
(3)環境保護:如利用轉基因細菌降解有毒有害的化合物,吸收環境中的重金屬,分解泄漏的石油,處理工業廢水等。
(4)用于基因診斷和基因治療:基因診斷是利用放射性同位素(如32P)或熒光分子等標記的DNA分子作探針,利用DNA分子雜交原理,鑒定被測標本上的外源基因是否導人有基因缺陷的細胞中,以達到治療疾病的目的。
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